Реализация мозаичного FLIM метода с помощью конфокальной сканирующей системы DCS-120 от Becker&Hickl

Специализированное SPCM программное обеспечение от компании Becker&Hickl для сбора данных, начиная с версии 9.76, позволяет управлять моторизированным предметным столиком микроскопа. В сочетании с конфокальной сканирующей FLIM системой DCS-120 такая функция дает возможность регистрировать массивы из FLIM изображений (мозаичный FLIM метод).

Такая система сканирует одно место образца и после определенного числа кадров сдвигает образец на размер отсканированной области. Этот процесс повторяется несколько раз. Данные, полученные в результате отдельных сканов, объединяются в общий x-y-t массив.

В целом представленный метод отличается от стандартной регистрации FLIM изображений только большим размером выделяемой памяти для регистрации распределения фотонов во всех элементах "мозаики", а не только на одном изображении.

Как правило FLIM изображения большой площади регистрируют с использованием объективов микроскопов с малым увеличением. Однако такие объективы также обладают низкой числовой апертурой. Низкие значения NA приводят к низкой эффективности сбора света, низкой эффективности возбуждения при многофотонном методе и слабому оптическому разрешению. Мозаичный FLIM метод позволяет получать изображения образца диаметром несколько мм при использовании объективов с большой числовой апертурой. В результате такой метод более эффективен и обеспечивает большее пространственное разрешение. Так как каждый элемент "мозаики" складывается в большое единое распределение фотонов, для анализа данных можно использовать стандартное SPCImage ПО от Becker&Hickl.

Изображение BPAE клеток, полученное методом мозаичного FLIM, 248x248 пикс., 256 временных каналов

Увеличенное изображение, полученное методом мозаичного FLIM

По вопросам приобретения и получения технических консультаций по продукции фирмы Becker&Hickl обращайтесь к представителю компании АЗИМУТ ФОТОНИКС.