Гибридные детекторы с временным разрешением менее 20 пс от Becker&Hickl для измерения концентрации НАД методом FLIM
Измерения концентраций восстановленной формы никотинамидаденин динуклеотида (nicotinamide adenine dinucleotide, NADH) методом визуализации времени жизни флуоресценции (fluorescence-lifetime imaging microscopy, FLIM) основаны на разделении компонентов сигнала затухания флуоресценции, относящихся к связанной и свободной формам NAD(P)H. Амплитуда и время затухания этих компонентов используют для получения информации о метаболическом статусе клеток или тканей.
Разделение компонентов сигнала флуоресценции, точность определения амплитуды и времени жизни флуоресценции можно улучшить, используя быстрые гибридные детекторы HPM-100-06 и HPM-100-07 от компании Becker&Hickl. Полуширина аппаратной функции этих детекторов в комбинации с TCSPC платами SPC-150N и SPC-150NX от Becker&Hickl составляет менее 20 пс. Такой быстрый отклик не интерферирует с сигналом затухания флуоресценции. Стандартная операция восстановление сигнала методом обращения свёртки при обработке данных практически становится простым подбором аппроксимирующей кривой функции, и таким образом вычисление параметров сигнала затухания становится более точным.
На верхнем рисунке ниже представлено изображение времени жизни флуоресценции и аппроксимация функции распада. Справа представлена функция распада в выбранной области размерам 9x9 пикселей. Благодаря быстрому отклику системы детектор/TCSPC плата регистрация сигнала происходит практически мгновенно. Изображения отношения амплитуд сигналов a1/a2 (свободная и связанная формы), времени жизни флуоресцентного сигнала свободной формы NADH (t1) и связанной формы (t2) представлены в нижнем ряду.
|
|
|
|
|
|
|
Для получения технических консультаций, а также по вопросам приобретения детекторов для счета фотонов от компании Becker&Hickl обращайтесь к представителям компании АЗИМУТ ФОТОНИКС.
