Методы флуоресцентной микроскопии давно заняли важное место среди технологий исследования биологических объектов. Для работы с клетками и тканями применяются разнообразные флуоресцентные метки, кроме того, в биологическом материале присутствуют разнообразные эндогенные флуорохромы. Помимо спектра и интенсивности флуорохромы характеризуются длительностью жизни флуоресценции. Микроскопия визуализации времени жизни флуоресценции (fluorescence-lifetime imaging microscopy, FLIM) оценивает пространственное распределение флуоресцентных меток с учётом длительности жизни флуоресценции. Метод FLIM позволяет различать флуоресценцию, исходящую от различных флуорохромов, и аутофлуоресценцию молекул образца, даже если они имеют схожий спектр излучения. FLIM применяется для изучения пространственных и временных белок-белковых взаимодействий, свойств мембран и взаимодействий с нуклеиновыми кислотами в живых клетках. Метод FLIM также можно применять для получения информации об окружении флуорофора на основе изменения его времени жизни.
Системы FLIM собираются, как правило, на основе конфокальных и мультифотонных микроскопов, а также на флуоресцентных микроскопах широкого поля. Сканирующие микроскопы обеспечивают более высокое разрешение, с другой стороны, в эпифлуоресцентном режиме данные по всем наблюдаемым областям собираются единовременно. Время жизни флуорохромов, используемых в качестве меток, длится 10-9 -10-6 секунд. Это определяет требования к детекторам, используемым для FLIM, поскольку требуется очень быстрое получение изображений. Мультиканальные фотоумножители, лавинные фотодиоды, высокоскоростные фоторегистраторы с синхронизированной развёрткой и камеры ПЗС с захватом изображения 200 пс могут использоваться для этих целей.
Стандартная конфигурация FLIM системы для микроскопов традиционно состоит из настольной TCSPC системы для счета фотонов серии Simple-Tau, которая может работать в одноканальном, двухканальном или четырехканальном режиме конфокального FLIM, многофотонного FLIM, NDD FLIM, многоспектрального FLIM, флуоресцентной корреляционной спектроскопии (FCS). В качестве детекторов для FLIM систем используются гибридные детекторы серии HPM-100 или SPAD модули для счета фотонов, обладающие высокой скоростью счета, быстрым откликом, отсутствием послеимпульсов и диффузионного хвоста. Также возможно применение 16-канальных многоволновых детекторов серии MW FLIM, которые регистрируют фотоны одновременно в 16 спектральных каналах. В качестве источников излучения рекомендуется использовать пикосекундные диодные лазеры с длиной волны излучения 405 нм, 445 нм, 473 нм, 488 нм, 640 нм способные работать в импульсном или непрерывном режиме.
Особенности:
- подходит для всех типов микроскопов;
- конфокальный FLIM (визуализации времени затухания флуоресценции);
- TCSPC система, построенная на одном детекторе;
- параллельная TCSPC система, построенная на двух детекторах;
- многоспектральная FLIM система;
- высокая скорость счета;
- одновременная регистрация фотонов во всех спектральных диапазонах;
- короткое время опроса;
- режим записи временных отметок и гистограммы;
- флуоресцентная корреляционная спектроскопия (FCS), корректировка и настройка в реальном времени;
- большой размер изображений в режиме FIFO;
- быстрый просмотр изображений во всех FLIM режимах.
Технические параметры стандартных FLIM систем компании Becker&Hickl:
|
Параметр |
FLIM система с одним детектором |
FLIM система с двумя детекторами |
Многоспектральная FLIM система |
|
Тип TCSPC системы |
Simple-Tau 150 |
Simple-Tau 152 |
Simple-Tau 150 |
|
Требуемые компоненты |
Ноутбук |
Ноутбук |
Ноутбук |
|
PCI расширитель |
PCI расширитель |
PCI расширитель | |
|
один SPC-150 TCSPC модуль |
два SPC-150 TCSPC модуля |
один SPC-150 TCSPC модуль | |
|
DCC-100 контроллер детектора |
DCC-100 контроллер детектора |
DCC-100 контроллер детектора | |
|
Ширина IRF |
2.5 пс rms/8 пс fwhm |
2.5 пс rms/8 пс fwhm |
2.5 пс rms/8 пс fwhm |
|
Минимальная ширина временного канала |
820 фс |
820 фс |
820 фс |
|
Насыщенная скорость считывания |
10 МГц |
20 МГц |
10 МГц |
|
Поддерживаемая скорость считывания: |
|
|
|
|
Режим Scan Sync In |
10 МГц |
20 МГц |
10 МГц |
|
Режим FIFO Imaging |
4 МГц |
4 МГц |
4 МГц |
|
Скорость сканирования |
любая |
любая |
любая |
|
Скорость синхронизации |
через импульсы Frame Clock, Line Clock, Pixel Clock | ||
|
Увеличение |
автоматическое увеличение с увеличением в микроскопе | ||
|
Отображение в реальном времени |
в программируемые интервалы, 1 секунда или более | ||
|
Максимальный размер изображения: |
|
|
|
|
Режим FIFO Imaging |
130 Мб |
260 Мб |
130 Мб |
|
pxLx x pxLy x t (примеры) |
256х256х1024 |
2х 256х256х1024 |
16х 256х256х64 |
|
512х512х256 |
2х 512х512х256 |
16х 128х128х256 | |
|
1024х1024х64 |
2х 1024х1024х64 |
| |
|
Максимальный размер изображения: |
|
|
|
|
Режим Scan Sync In |
4 Мб |
2х4 Мб |
4 Мб |
|
pxLx x pxLy x t (примеры) |
256х256х64 |
2х 256х256х64 |
16х 128х128х64 |
|
128х128х256 |
2х 128х128х256 |
| |
|
Требования к микроскопу: |
|
|
|
|
Многофотонный NDD FLIM |
должен быть доступен NDD порт (non-descanned detector) | ||
|
Конфокальный FLIM |
должен быть доступен конфокальный выход – прямой или оптоволоконный порт | ||
|
Другие FLIM конфигурации |
Все FLIM системы компании Becker&Hickl представляют собой модульные блоки и гибко оптимизируются под конкретную задачу заказчика. Существует огромное количество различных конфигураций FLIM систем. | ||
|
Поставщик
|
Becker&Hickl |
Оплата продукции производится по безналичному расчету на основании счета либо договора поставки. Компания АЗИМУТ ФОТОНИКС принимает участие в конкурсных торгах (электронных аукционах) на выполнение заказов от бюджетных организаций. Для бюджетных организаций предусмотрена работа с частичной предоплатой в рамках договоров по ФЗ.
Доставка оборудования и компонентов во все регионы России осуществляется транспортными компаниями (Major Express, Гарантпост, СДЭК) с обязательным соблюдением требований к транспортировке и хранению, также возможен самовывоз из нашего офиса в Москве. Условия отправки груза в страны СНГ и ЕАЭС необходимо уточнять отдельно у специалистов нашей компании.
